Выберите верные утверждения о процессе синтеза кДНК.

для обратной транскрипции используется обратная транскриптаза — ДНК-зависимая ДНК-полимераза


использование олиго-Т-праймера позволяет перевести в кДНК все клеточные РНК, включая рибосомальные РНК


для перевода мРНК, выделенных из бактерий, в форму кДНК может использоваться олиго-Т праймер


обратная транскрипция является необходимым этапом для определения содержания вируса гриппа (РНК-содержащий вирус) в биоматериале с помощью количественной ПЦР


обратная транскрипция не может использоваться для перевода некодирующих РНК в форму кДНК


для синтеза кДНК необходимы мономеры — дезоксирибонуклеозидтрифосфаты

Верные утверждения:

✅ Для перевода мРНК, выделенных из бактерий, в форму кДНК может использоваться олиго-Т праймер.
Олиго-Т-праймеры связываются с поли-А-хвостом мРНК. У эукариот большинство зрелых мРНК имеют поли-А-хвост, поэтому такой праймер широко применяется. У бактерий классического поли-А-хвоста у большинства мРНК нет, однако у некоторых бактериальных мРНК полиаденилирование может происходить, поэтому в отдельных случаях олиго-Т-праймер может использоваться. На практике для бактериальных РНК чаще применяют случайные праймеры.

✅ Обратная транскрипция является необходимым этапом для определения содержания вируса гриппа (РНК-содержащий вирус) в биоматериале с помощью количественной ПЦР.
Вирус гриппа содержит РНК, а ПЦР позволяет амплифицировать только ДНК. Поэтому перед количественной ПЦР необходимо провести обратную транскрипцию, то есть получить кДНК на матрице вирусной РНК. Такой метод называется ОТ-ПЦР (RT-qPCR).

✅ Для синтеза кДНК необходимы мономеры — дезоксирибонуклеозидтрифосфаты.
Обратная транскриптаза синтезирует цепь ДНК, поэтому ей нужны дезоксирибонуклеозидтрифосфаты (дАТФ, дГТФ, дЦТФ, дТТФ), которые являются строительными блоками ДНК.

Неверные утверждения:

❌ Для обратной транскрипции используется обратная транскриптаза — ДНК-зависимая ДНК-полимераза.
Неверно. Обратная транскриптаза является РНК-зависимой ДНК-полимеразой, так как использует молекулу РНК в качестве матрицы и синтезирует ДНК.

❌ Использование олиго-Т-праймера позволяет перевести в кДНК все клеточные РНК, включая рибосомальные РНК.
Неверно. Олиго-Т-праймер связывается только с РНК, содержащими поли-А-хвост. Рибосомальные РНК такого хвоста не имеют, поэтому они не будут эффективно транскрибироваться в кДНК с помощью олиго-Т-праймера.

❌ Обратная транскрипция не может использоваться для перевода некодирующих РНК в форму кДНК.
Неверно. Обратная транскрипция может применяться для различных некодирующих РНК (например, микроРНК), если подобрать подходящие праймеры и условия реакции.

Таким образом, правильные варианты:

✔ для перевода мРНК, выделенных из бактерий, в форму кДНК может использоваться олиго-Т праймер
✔ обратная транскрипция является необходимым этапом для определения содержания вируса гриппа с помощью количественной ПЦР
✔ для синтеза кДНК необходимы дезоксирибонуклеозидтрифосфаты